Энциклопедия экспериментов JoVE
Биология
0 просмотров • 2:56 мин. • April 30th, 2023
- C. elegans используется в качестве экспериментальной модели инфекции кишечными патогенами, вызывающими заболевание, в частности, нарушая кишечный барьер, повышая его проницаемость. Чтобы количественно оценить целостность барьера после воздействия интересующих бактерий или химических соединений, соберите червей, смыв их с пластин.
Затем поместите этих червей на агаровые тарелки с маркированной пищей, состоящей из убитой при нагревании кишечной палочки, смешанной с ФИТК-декстраном, высокомолекулярным полисахаридом с флуоресцентной меткой.
Позвольте червям поедать помеченные бактерии. У червей с неповрежденным кишечным барьером пища быстро выводится из организма, в то время как у червей с более проницаемым кишечником флуоресцентный маркер проникает за пределы просвета органа.
Переведите глистов в раствор формальдегида, чтобы закрепить животных. Через 1-2 минуты замените формальдегид монтажным материалом.
Наконец, визуализируйте червей с помощью флуоресцентной микроскопии. Обратите внимание, что кишечные гранулы C. elegans являются автофлуоресцентными, поэтому будет присутствовать фоновый сигнал. Но в целом, большая флюоресценция кишечника указывает на более высокую проницаемость.
В
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео