Децеллюляризация жировых пакетов молочных желез: получение гидрогелей с внеклеточным матриксом из жировых пакетов молочных желез

Сначала поместите жировые пакеты молочных желез или МФУ в чашку с раствором Trypsin-EDTA и инкубируйте в течение желаемого времени, чтобы разорвать спайки клеточного матрикса. Промойте МФУ деионизированной водой и процедите через ситечко. Поместите салфетки в стакан с перемешивателем и добавьте Triton X-100. Перемешайте для лизиса клеток, не влияя на факторы роста во внеклеточном матриксе ткани.

Процедите МФУ и промойте деионизированной водой. Перенесите ткани обратно в стакан и добавьте дезоксихолевую кислоту для лизирования оставшихся клеток. Затем процедите МФУ и поместите в стакан с деионизированной водой с пенициллин-стрептомицином, чтобы предотвратить загрязнение. Инкубируйте стакан при температуре 4 градуса Цельсия на ночь.

Процедите МФУ и поместите их в стакан, содержащий этанол и надуксусную кислоту. Надуксусная кислота увеличивает жесткость внеклеточного матрикса ткани. Помешивайте некоторое время и повторите шаг процеживания. Промойте МФУ PBS, а затем деионизированной водой. Переложите процеженные МФУ в стакан, содержащий пропан-1-ол.

Некоторое время перемешайте, процедите содержимое и промойте МФУ деионизированной водой. Высушите МФУ и храните при температуре минус 80 г