Анализ XTT: колориметрический анализ для оценки жизнеспособности клеток и митохондриальной активности

- Низкочастотные ультразвуковые волны приводят к избирательному лизису клеток лейкемии человека, а анализ XTT помогает определить степень этого повреждения. Анализ основан на принципе, согласно которому митохондриальные ферменты здоровых клеток преобразуют желтый краситель XTT в оранжевое соединение под названием формазан. Чтобы начать анализ, обработайте клетки метилбета-циклодекстрином, разрушающим холестерин агентом, а затем обработайте клетки ультразвуком при низкой мощности, чтобы вызвать повреждение клеток.

Центрифуга для гранулирования клеток и добавления свежей питательной среды для клеток в гранулу. Засейте клетки в нужной концентрации в многолуночную микропластину и инкубируйте ее в течение ночи. Теперь добавьте активированный раствор XTT в клетки и инкубируйте до тех пор, пока в лунках микропланшета не разовьется оранжевый цвет. Поместите пластину в спектрофотометр. Измерьте поглощение на 450–500 нанометрах, а затем на 630–690 нанометрах. Вычтите эти два значения, чтобы получить точные результаты. Более высокое значение абсорбции в анализе XTT указывает на более высокую активность митохондриальных ферментов и более высокую жизнеспособность клеток.

В следующем видео мы пр