Сортировка клеток лейкоза на основе колонки G-10: метод очистки клеток острого лимфобластного лейкоза из стромальных клеток костного мозга

0 views • 2:57 min • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Для начала добавьте трипсин в планшет, содержащий клетки лейкемии, совместно культивируемые с костными костными стромальными клетками для диссоциации клеток. Центрифугируйте и повторно суспензируйте гранулу с использованием предварительно подогретой среды для поддержания жизнеспособности клеток. Колонка G-10 содержит сшитые шарики декстрана, которые набухают в воде, образуя гелевую матрицу.

Уравновесьте колонку G-10 предварительно подогретым материалом, чтобы заполнить пространство между валиками, обеспечивая медленный отрыв носителя от столбца. Поддерживайте подходящую температуру в колонне, чтобы предотвратить образование пузырьков воздуха. Медленно загрузите клеточную смесь на гелевые шарики в колонке G-10. Инкубируйте клетки на колонне G-10 при комнатной температуре в течение желаемого времени. Основываясь на характеристиках и размере поверхности клеток, гелевые шарики преимущественно ограничивают более крупные стромальные клетки костного мозга, позволяя разделять клетки лейкемии.

Добавьте в колонку предварительно подогретые среды и соберите суспензию клеток лейкоза. Центрифугируйте клеточную суспензию и повторно суспендируйте гранулу в соответствующем буфере. Используйте чистую популяцию клеток лейкемии для дальнейшего анализа. В следующем примере мы отделим чистую популяцию клеток лейкемии от кокультуры стромы с помощью столбца G-10.

- Когда запорный кран полностью закрыт для каждой субпопуляции, используйте пипетку объемом 1000 микролитров, чтобы добавить весь объем клеток объемом 1 миллилитр, капнув, на верхнюю часть одной из подготовленных колонок G-10, убедившись, что клетки остаются поверх или внутри гранулы G-10. Дайте клеткам инкубироваться на грануле G-10 в течение 20 минут при комнатной температуре. Затем добавьте от 1 до 3 миллилитров свежей, предварительно подогретой среды в колонку и откройте запорный кран так, чтобы среда медленно выходила из колонн по каплету.

Продолжайте добавлять в столбики предварительно подогретую среду с шагом от 1 до 2 миллилитров. Когда будет собрано в общей сложности от 15 до 20 миллилитров лейкозных клеток, закройте запорный кран и закупорьте трубку для сбора. Затем раскрутите ячейки вниз и снова суспендируйте гранулу в соответствующем буфере для анализа.

07:47

Proteoliposome-Based Efflux Анализ для определения одиночных молекул Свойства Cl - Каналы и перевозчиков

Related Videos

0 Views

09:42

Генерация мышиных моноклональных антител с помощью гибридом технологии

Related Videos

0 Views

15:04

Pepti'uick, одноступенчатая инкорпорация мембранных белков в биотинилатированные пептидиски для оптимизированных белковых связывающих анализов

Related Videos

0 Views

03:44

Сбор лейкозных субпопуляций: метод пространственного разделения субпопуляций лейкемических клеток из 2D кокультуры

Related Videos

0 Views

03:06

Отрицательная иммуномагнитная селекция: метод очистки В-клеток из мононуклеарных клеток периферической крови

Related Videos

0 Views

14:06

Выделение предшественника В-клеточных подмножеств из пуповинной крови

Related Videos

0 Views

10:18

С 2DE-гель пятна с белком Функция: Урок, извлеченный из HS1 в хронический лимфолейкоз

Related Videos

0 Views

08:01

Флуоресценция активированных сортировки клеток для очистки плазмоцитов дендритных клеток из костного мозга мыши

Related Videos

0 Views

09:57

Всеобъемлющий протокол выборки и процесс костного мозга для измерения поддающихся оценке остаточной болезни и лейкозных клеток острой миелоидной лейкемией

Related Videos

0 Views

09:01

Проточная цитометрия оценить стволовых клеток лейкемии в первичных острый миелолейкоз и пациент производные ксенотрасплантатов, диагностики и последующей вверх

Related Videos

0 Views

Last updated: 25 July 2026