Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 3:18 мин. • April 30th, 2023
- Во-первых, возьмите мышь под наркозом за шею и выпячьте глаз. Вставьте тонкую капиллярную трубку в медиальный кантус глаза. Дайте крови течь капиллярным действием в пробирку. Перелейте кровь в пробирку, покрытую покрытием ЭДТА, и держите ее на льду. ЭДТА связывает ионы кальция, препятствуя свертыванию крови. Более низкая температура снижает гликолитическую активность клеток и вероятность микробного загрязнения.
Далее разбавьте кровь буфером, содержащим ЭДТА, и хорошо перемешайте. Аккуратно добавьте на дно слой соответствующего разделительного раствора, не тревожа кровь. Центрифугируйте суспензию. Полимер в разделительном растворе агрегирует эритроциты и осадок на дне. Мононуклеарные элементы и тромбоциты, будучи легче полимера, откладываются выше полимерного градиента.
Удалите верхний слой, содержащий плазму, и соберите непрозрачное белое кольцо, содержащее мононуклеарные клетки. Разбавьте клетки с помощью PBS и центрифуги для удаления остаточной плазмы и тромбоцитов. Используйте выделенные мононуклеарные клетки для дальнейшего анализа. Следующий протокол продемонстрирует выделение мононуклеарных клеток из конгенной мыши, которой была введена лейкемическая клеточная линия C1498.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео