Окрашивание по Май-Грюнвальду-Гимзе: метод окрашивания клеток костного мозга

0 просмотров3:12 мин • April 30th, 2023

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

- Май-Грюнвальд-Гимса, или окрашивание MGG, представляет собой двухэтапную процедуру дифференциального окрашивания клеток костного мозга, или BMC. Чтобы начать окрашивание, получите концентрированный однослойный мазок БМК на предметном стекле. Дайте мазку высохнуть на воздухе. Сначала обработайте клетки красителем Май-Грюнвальда, содержащим эозин и растворенный в метаноле метиленовый синий.

Растворитель метанол первоначально фиксирует клетки. Метиленовый синий, основной краситель с чистым положительным зарядом, окрашивает кислые клеточные компоненты, такие как нуклеиновые кислоты. Эозин, кислотный краситель с чистым отрицательным зарядом, окрашивает основные клеточные компоненты, такие как цитоплазматические катионные белки. Обработайте клетки буферным раствором с pH 6,8, чтобы краситель мог осаждаться и хорошо связываться с клеточными материалами.

Кроме того, обработайте клетки красителем Гимзы, также содержащим кислотные и основные красители, для усиления общего эффекта окрашивания. Основные красители, лазурь и метиленовый синий, усиливают окрашивание кислотных компонентов, в то время как кислотный краситель, эозин, усиливает окрашивание основных компонентов.

Под микроскопом эритроциты выглядят розовато-коричневыми, а тромбоциты – мелкими фиолетовыми точками. Гранулоциты имеют фиолетово-синее многолопастное ядро и красную гранулированную цитоплазму. Агранулоциты выглядят прозрачно-голубыми с большим фиолетово-розовым ядром. В следующем протоколе мы показываем окрашивание клеток костного мозга методом MGG.

- Чтобы подготовить клетки костного мозга к окрашиванию, сначала поместите горки в одноразовые камеры с предварительно прикрепленными фильтрующими картами и поместите камеры в цитоцентрифугу. Добавьте 100 микролитров буфера FACS в каждую камеру фильтрующей карты и кратко центрифугируйте предметные стекла. В конце отжима добавьте по 100 микролитров клеток в каждую камеру и центрифугируйте клетки.

Затем осторожно выньте предметные стекла из камер для сушки на воздухе. Чтобы окрашивать клетки костного мозга, погрузите предметные стекла в баночку Coplin, содержащую раствор Мэя-Грюнвальда, на 5 минут. Далее переложите предметные стекла в банку с буферным раствором с pH 6,8 на 1 минуту. Затем перенесите предметные стекла в раствор Giemsa R на 10 минут, после чего следует 10-секундное промывание pH-нейтральной водой.

После промывки дайте предметным стеклам высохнуть на воздухе и нанесите по одной капле монтажного средства на каждый образец. Затем поместите один край покровного стекла на предметное стекло и осторожно опустите покровное стекло на ячейки, осторожно надавливая, чтобы удалить пузырьки воздуха.

09:07

Анализ функций тучных клеток In Vivo с использованием 'Mast Cell Knock-in'Mice

Похожие видео

0 Просмотры

11:20

Оценка вторжения клеток и процесс миграции: сравнение видео на базе микроскопа нуля раны пробирного и пробирной палаты Бойдена

Похожие видео

0 Просмотры

10:21

Пролиферации и дифференцировки Murine миелоидного прекурсоров 32D/G-CSF-r клетки

Похожие видео

0 Просмотры

07:29

Undecalcified Подготовка костей для гистологии, гистоморфометрии и флуорохромами Анализ

Похожие видео

0 Просмотры

03:56

Аспирация костного мозга: метод получения костного мозга для изучения морфологии клеток

Похожие видео

0 Просмотры

02:52

Окрашивание по Гимзе для анализа на образование колоний: процедура окрашивания in vitro для оценки пролиферативной способности мезенхимальных стволовых клеток

Похожие видео

0 Просмотры

09:31

Автоматизированная Количественное кроветворной клетки - Стромальные межклеточного взаимодействия в гистологических Изображения Undecalcified Bone

Похожие видео

0 Просмотры

08:00

Подробный протокол Характеризуя клеточной линии мышиной C1498 и его модель Associated Лейкоз Mouse

Похожие видео

0 Просмотры

09:57

Всеобъемлющий протокол выборки и процесс костного мозга для измерения поддающихся оценке остаточной болезни и лейкозных клеток острой миелоидной лейкемией

Похожие видео

0 Просмотры

08:15

На месте Исследование мышиного мегакариопоэтиса с помощью просвечивающих электронных микроскопий

Похожие видео

0 Просмотры

Последнее обновление: 15 августа 2026