Энциклопедия экспериментов JoVE
Исследования рака
0 просмотров • 5:21 мин. • April 30th, 2023
- Гемопоэтические стволовые и прогениторные клетки или ГСКК, могут самообновляться и дифференцироваться в различные типы клеток крови. ГСКК постепенно накапливают мутации ДНК в течение жизни, которые могут способствовать развитию лейкемии. Для анализа таких мутаций ГСКК обычно генерируются из костного мозга.
Начните с добавления флуорофор-конъюгированных антител к мононуклеарным клеткам — взрослым стволовым клеткам, выделенным из костного мозга — и инкубируйте их в течение желаемого времени. Антитела связываются со специфическими маркерами клеточной поверхности, такими как CD34. Теперь загрузите смесь в флуоресцентно-активируемую клеточную цитометрию или аппарат FACS.
Флуорофор-конъюгированные антитела флуоресцируют при попадании лазера. Отдельные капли клеток проходят через детектор, который измеряет интенсивность флуоресценции, на основе чего капля обладает электрическим зарядом. В присутствии электромагнитных полей положительно заряженные элементы перемещаются в отрицательный контейнер и наоборот.
Теперь выращивайте CD34-положительные ГСК, отсортированные FACS, в подходящей среде в течение желаемого периода времени, пока клоны не станут видимыми. Затем вытесните клоны с помощью
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео