Выделение флуоресцентно меченых клеток T-ALL: метод выделения клеток T-ALL от взрослых рыбок данио

- Т-клеточный острый лимфобластный лейкоз, или Т-ОЛЛ, — это тип рака, который возникает, когда лимфоциты не созревают и остаются незрелыми клетками, называемыми лимфобластами. Эти аномальные клетки неэффективны в борьбе с инфекцией. Поскольку эти незрелые клетки быстро делятся, они превосходят по численности здоровые клетки крови и могут перемещаться к таким органам, как селезенка, печень и ЦНС.

Опухоли у рыбок данио похожи на те, которые образуются у человека. Таким образом, рыбки данио являются предпочтительной моделью для создания опухолевых клеток T-ALL.

Начните с выбора трансформированных рыб, которые проявляют флуоресцентные сигналы, указывающие на распространение опухолевых клеток. Удалите усыпленную рыбу голову и промойте полость тела раствором гепарина, чтобы удалить излишки эритроцитов. Теперь введите подходящий буфер в полость тела. Слегка надавите снаружи и соберите буфер, содержащий опухолевые клетки, в микрофугальную пробирку.

Покрасьте клетки трипановым синим цветом и понаблюдайте за ними под микроскопом. Живые опухолевые клетки выглядят флуоресцентными и бесцветными при окрашивании трипановым синим, так как отрицательно заряженная клеточная мембрана исключает попада