JoVE Encyclopedia of Experiments
Нейронауки
0 просмотров • 1:23 мин • March 4th, 2025
Возьмите химически фиксированные, залитые парафином участки мозга у крысы с инфарктом головного мозга, где ограниченный кровоток вызывает гибель клеток в пораженной области.
Погрузите ткань в ксилол, чтобы растворить парафин.
Погрузите ткань в абсолютный спирт для удаления остатков ксилола.
Увлажните ткань, пропустив ее через убывающую концентрацию алкоголя.
Промойте ткань водой, чтобы устранить остатки спирта.
Нанесите гематоксилин, основной краситель, который связывается с ДНК, окрашивая ядра в фиолетовый цвет.
Смойте водой и кислым спиртом, чтобы удалить излишки гематоксилина.
Промойте щелочным раствором, чтобы ядерное пятно окрасилось в синий цвет.
Нанесите эозин, кислотный краситель, который окрашивает положительно заряженные цитоплазматические и внеклеточные матриксные белки в розовый цвет.
Обезвоживайте ткани с помощью повышения концентрации спирта.
Погрузите ткань в ксилол, чтобы очистить ее, затем установите и визуализируйте под микроскопом.
Контрольные участки выглядят розовыми с синими ядрами, в то время как инфарктные участки кажутся бледными из-за недостаточного окрашивания, вызванного гибелью клеток.