Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 1:21 мин. • March 4th, 2025
Возьмите срез ткани мозга у мыши, подвергшейся легкой хронической церебральной гипоперфузии, или MCCH, и введите бета-амилоидные пептиды.
MCCH характеризуется снижением притока крови к мозгу. Это ограничивает поступление кислорода и питательных веществ в слой эндотелиальных клеток кровеносных сосудов головного мозга, повреждая клетки.
Повреждение увеличивает проницаемость сосудистой стенки, позволяя вводимым пептидам бета-амилоида накапливаться в стенке и образовывать бляшки.
Промойте секцию буфером, чтобы удалить остатки химических веществ.
Инкубируйте с тиофлавином S, флуоресцентным красителем, который связывается с амилоидными бляшками.
Промойте испачканный участок спиртом в уменьшающейся концентрации, чтобы удалить несвязанный краситель и увлажнить ткань.
Поместите секцию в буфер для поддержания гидратации.
Установите секцию с помощью монтажной среды, которая сохраняет интенсивность флуоресценции красителя.
Под флуоресцентным микроскопом исследуйте наличие флуоресцентно меченных амилоидных отложений, чтобы подтвердить индуцированную MCCH агрегацию бета-амилоида.