JoVE Encyclopedia of Experiments
Нейронауки
0 просмотров • 1:29 мин • March 4th, 2025
Возьмите химически фиксированные срезы мозга, полученные от самки мышиной модели болезни Альцгеймера.
Эти участки содержат нейрофибриллярные клубки — аномальные агрегаты тау-белка, обнаруженные в нейронах гиппокампа.
Промойте секции буфером, а затем деионизированной водой.
Обрабатывать периодической кислотой для окисления гликозильных групп, связанных с агрегатами, образующими альдегидные группы.
Промойте деионизированной водой и добавьте щелочной раствор йодида серебра. Ионы серебра образуют комплексы с альдегидами, создавая сайты зародышеобразования.
Промойте разбавленной слабой кислотой, чтобы удалить несвязанное серебро и нейтрализовать pH.
Смойте деионизированной водой.
Добавьте охлажденный раствор проявителя, содержащий восстановитель для преобразования ионов серебра в металлическое серебро, придающее ему бледно-коричневый цвет.
Смойте разведенной слабой кислотой, чтобы остановить развитие.
Установите секции, обезвожьте их с помощью повышения концентрации спирта и нанесите монтажную среду.
Загерметизируйте секции покровным стеклом.
С помощью светового микроскопа визуализируйте нейрофибриллярные клубки.