Энциклопедия экспериментов JoVE
Нейронауки
0 просмотров • 1:17 мин. • March 4th, 2025
Гепарансульфат, гликозаминогликан, присутствует в амилоидных бляшках, связанных с болезнью Альцгеймера.
Чтобы визуализировать сульфат гепарана, начните с пораженного участка ткани гиппокампа человека, содержащего амилоидные бляшки.
Зафиксируйте участок ткани с помощью фиксатора для сохранения клеточных структур.
Затем обработайте ткань блокатором, чтобы предотвратить связывание неспецифических антител.
Добавьте неионогенное моющее средство, чтобы проникнуть в клеточные мембраны.
Инкубируйте ткань с первичными антителами, которые специфически нацелены на сульфат гепарана внутри амилоидных бляшек.
Смойте несвязанные первичные антитела.
Затем добавьте флуорконъюгированные вторичные антитела, которые связываются с первичными антителами, прикрепленными к сульфату гепарана.
Удалите все несвязанные антитела.
Окрасьте ядра с помощью флуоресцентного красителя.
Наконец, используйте флуоресцентный микроскоп для визуализации флуоресцентно меченного сульфата гепарана в амилоидных бляшках и ядер синего цвета в пораженной ткани.