Выделение бактериальных внеклеточных везикул с помощью эксклюзионной хроматографии

Возьмите хроматографию исключения из размера или колонку SEC, заполненную гранулами пористой смолы определенного размера. Он содержит резервуар для проб в верхней части.

Добавьте фосфатно-солевой раствор или PBS, чтобы уравновесить бусины-колонны, и выбросьте протекание.

Загрузите концентрированный фильтрат бактериальной культуры, содержащий внеклеточные везикулы или ВВ, секретируемые белки и загрязняющие вещества.

EV — это нановезикулы на основе липидов, которые переносят биологически активные молекулы и выделяются бактериями.

Как только фильтрат попадет в шарики, добавьте PBS, чтобы пропустить его через слой смолы.

Выбросьте исходный элюат, содержащий крупные невезикулярные загрязнения.

Поместите трубку для сбора под выпускное отверстие и последовательно добавьте PBS.

Крупногабаритные электромобили обходят более мелкие поры смолы, перемещаются через межчастичные пространства между шариками и сначала элюируются.

Более мелкие белки и загрязняющие вещества проникают в поры, идут более длинными путями и позже вымываются.

Соберите фракции с ранним покрытием, содержащие EV, и сохраните их для анализа.

Для выделения ВВ проводят эксклюзионную хроматографию (SEC) с использованием небольшой колонки