Анализ in vivo бактериальных инфекций, ассоциированных с имплантатами, с использованием эмбрионов рыбок данио

Начните с посуды, содержащей агарозную камеру, отлитую с углублениями.

Каждая бороздка содержит обезболенные эмбрионы данио-рерио, погруженные в эмбриональную среду с добавлением анестетика.

Под световым микроскопом введите в мышечную ткань иглу для микроинъекций.

Введите суспензию, содержащую S. aureus и микросферы полистирола, чтобы смоделировать инфекцию, ассоциированную с имплантатом.

Переведите введенные эмбрионы в отдельные лунки многолуночной пластины, заполненной свежей средой, и инкубируйте.

Микросферы имеют физическую поверхность, которая поддерживает колонизацию бактерий и способствует инфекции.

Чтобы оценить бактериальную инфекцию, ассоциированную с имплантатом, перенесите каждый эмбрион в отдельную пробирку и промойте ее буфером. Добавьте буфер и керамические шарики.

Гомогенизируйте для лизирования эмбрионов и высвобождения внутреннего содержимого, включая бактерии.

Выложите на тарелки разведенные гомогенаты, затем инкубируйте, чтобы дать возможность образоваться колонии.

Эмбрионы, введенные с микросферно-бактериальной суспензией, демонстрируют более высокое количество колоний, чем эмбрионы, введенные только с бактериальной суспензией. Это свидетельствует о том, что микросферы