Чувствительный визуальный метод для обнаружения бактерий, продуцирующих сероводород

Начните с планшета, содержащего суспензию различных бактерий, производящих сероводород, способных метаболизировать соединения, богатые серой.

Добавьте раствор хлорида висмута, который содержит L-цистеин в качестве источника серы, и кратковременно инкубируйте смесь.

Во время инкубации бактерии используют L-цистеин и производят сероводород, который вступает в реакцию с ионами висмута с образованием нерастворимого черного осадка сульфида висмута.

Эта реакция меняет цвет раствора со светло-желтого на черный, что указывает на образование сероводорода.

Затем выполните анализ, используя различные концентрации гидросульфида натрия в качестве стандарта сероводорода, и добавьте хлорид висмута.

Это создает цветовой градиент от светлого до интенсивного черного, представляющий уровни сероводорода.

Теперь используйте этот градиент для визуального сравнения и оценки уровней сероводорода в образцах бактерий, что позволяет быстро обнаруживать бактерии, продуцирующие сероводород.

Смешайте 100 микролитров бактериальной культуры со 100 микролитрами только что приготовленного раствора висмута в 96-луночных микротитровых планшетах и закваливайте в течение 20 минут при температуре 37 градусов Цельсия. Для каждого штамма бактерий выполняйте анализ в трех экземплярах.

Через 20 минут проверьте изменение цвета. Если цвет раствора меняется со светло-желтого на черный, это говорит о том, что бактерия способна вырабатывать сероводород или H2S. Повторите это измерение три раза.

Определяют чувствительность метода с помощью различных концентраций гидросульфида натрия, смешанного с раствором сульфида висмута. Наконец, определите присутствие бисульфида и сульфид-ионов, наблюдая за образованием черного осадка сульфида висмута. Оценивайте цвет лунок по визуальной шкале от отсутствия цвета до самого темного черного цвета.