Приготовление одноклеточного бактериального посева

Возьмите метаболически активную культуру Mycobacterium marinum. Это обеспечивает высокую жизнеспособность бактерий и оптимальное физиологическое состояние.

Центрифугируйте культуру для гранулирования бактерий.

Выбросьте излишки надосадочной жидкости и повторно суспендируйте гранулу в свежей среде, содержащей диспергирующий агент.

Перенесите суспензию в микроцентрифужные пробирки и обработайте ультразвуком в контролируемых условиях.

Ультразвуковая обработка разрушает бактериальные агрегаты и рассеивает клетки, в результате чего получается жизнеспособная суспензия одиночных клеток.

Соберите ультразвуковую суспензию в шприц и пропустите ее через мембранный фильтр, чтобы удалить оставшиеся комки, обеспечивая равномерную популяцию одиночных клеток.

С помощью спектрофотометра измерить оптическую плотность бактериальной суспензии.

Разбавить суспензию свежими криопротекторсодержащими средами до достижения нужной бактериальной концентрации с сохранением жизнеспособности клеток.

Аликвот готовую одноклеточную суспензию и храните ее при сверхнизких температурах. Криопротектор помогает сохранить жизнеспособность бактерий при длительном хранении.

После посева в соответствии с рукописью центрифугируйте ку