Высокопроизводительная идентификация полимеров, отталкивающих бактерии, с помощью скрининга на микрочипах

Поместите стерилизованное предметное стекло с агарозным покрытием и несколькими полимерными пятнами в многолуночный планшет. Агароза сводит к минимуму неспецифическое связывание бактерий.

Добавьте на предметное стекло смешанную бактериальную культуру и инкубируйте ее при осторожном перемешивании.

Бактерии выделяют различные белки адгезии, которые связываются с благоприятными полимерными пятнами, что приводит к более сильному прикреплению бактерий и колонизации с течением времени.

И наоборот, репеллентные полимеры противостоят адсорбции белка и уменьшают прикрепление бактерий.

Промойте предметное стекло фосфатно-солевым буфером или PBS, чтобы удалить слабо связанные бактерии.

Добавьте DAPI, чтобы окрашивать ДНК бактерий, прикрепленных к поверхности.

Вымойте предметное стекло PBS, высушите его и заклейте клейким покровным стеклом.

Стерилизуйте внешнюю поверхность предметного стекла этанолом.

Делайте снимки в светлом поле, чтобы найти полимерные пятна. Затем переключитесь в режим флуоресценции, чтобы обнаружить флуоресценцию на полимерных пятнах.

Полимерные пятна, которые демонстрируют пониженную флуоресценцию, указывают на минимальное бактериальное прикрепление и идентифицируются как полимеры