Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:05 мин. • September 26th, 2025
Начните со стерильной пробирки, содержащей питательную среду, специфичную для хозяина. Добавьте бактериальную культуру, выращенную за ночь.
Затем введите фильтрат, содержащий сахарибактерии, паразитические ультрамалые бактерии, для создания бинарной культуры.
Инкубируйте бинарную культуру в микроаэробных условиях, оптимальных для бактерий-хозяев.
Питательные вещества в среде способствуют росту и размножению бактерий-хозяев, делая культуру мутной.
Из-за своей облигатной паразитарной природы сахарибактерии прикрепляются к поверхности бактериальных клеток хозяина.
Затем эти бактерии образуют тесные мембранные контакты с хозяином и извлекают питательные вещества, необходимые для их выживания и размножения.
По мере прогрессирования инфекции рост бактериального хозяина замедляется, что приводит к снижению мутности.
Чтобы поддерживать непрерывный рост, регулярно перекладывайте бинарную культуру в свежую среду.
Это поддерживает жизнеспособность хозяина и способствует долгосрочной стабильности бинарной культуры.
Подготовьте пробирки для культур, всыпав в пробирки два миллилитра соответствующей питательной среды.
Затем добавьте в каждую пробирку 200 микролитров ночной культуры организмов-хозяев и от 100 до 200 микролитров ресуспендированной отфильтрованной пробы. Инкубируйте объединенные образцы в условиях, подходящих для организма хозяина. Проходите клетки каждые два-три дня, пересаживая 200 микролитров бинарной культуры в два миллилитра свежей питательной среды в новой пробирке.
Если пассированные культуры не показывают роста при 200 мк неинфицированной культуры хозяина, то при прохождении клеток инокулированные пробирки возвращают в инкубатор.