Одноклеточная культура бактерий в гигантских везикулах

Начните с камерного стеклянного предметного стекла, покрытого опорной мембраной, состоящей из фосфолипидов, в том числе биотинилированных фосфолипидов.

Инкубируют с нейтравидином, который связывается с биотином на бислое. Умывайтесь, чтобы удалить излишки нейтравидина.

Вводите питательную среду, содержащую гигантские везикулы или GV. Каждая GV представляет собой сферическую липидную двухслойную везикулу размером в микрон, которая инкапсулирует одну бактериальную клетку, служа моделью для изучения поведения отдельных клеток в замкнутой среде.

Нейтравидин связывается с биотинилированными липидами GV, прикрепляя везикулы к поддерживаемой мембране для стабильного и долгосрочного наблюдения в статических условиях.

Закройте камеру, чтобы сохранить гидратацию и свести к минимуму загрязнение.

Поместите предметное стекло на предметный столик для микроскопа, оборудованный нагревательной платформой, чтобы смоделировать физиологические условия и наблюдать под микроскопом.

Питательные вещества из среды диффундируют в GV, поддерживая рост бактерий с течением времени.

Эта установка позволяет в режиме реального времени визуализировать рост бактерий одиночных клеток в ограниченном микроокружении везикул.

Ч