Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 4:20 мин. • September 26th, 2025
Начните с многолуночного планшета, содержащего питательную среду, предварительно инокулированную бактериями, производящими целлюлозу.
В обработанной скважине среду дополняют 2-хлорэтилфосфоновой кислотой (CEPA).
Закройте пластину для предотвращения газообмена и проведите инкубацию.
Во время инкубации CEPA гидролизует и высвобождает этилен, газообразную молекулу.
Этилен активирует бактериальную целлюлозную синтазу, которая использует цитозольную UDP-глюкозу для синтеза целлюлозы.
Со временем бактерии выдавливают целлюлозу через свою мембрану.
Это способствует самосборке бактерий на границе раздела воздух-жидкость, образуя плавающую биопленку на основе целлюлозы, или пленку.
После инкубации переложите пленки в свежую многолуночную пластину. Добавьте щелочной раствор и инкубируйте при более высокой температуре, чтобы лизировать клетки.
Удалите щелочной раствор. Многократно мойте с помешиванием, чтобы удалить клеточный мусор с сохранением целлюлозы.
Просушите и взвесьте пленки. Более высокая сухая масса в образцах, обработанных CEPA, по сравнению с контролем указывает на повышенное производство бактериальной целлюлозы в ответ на этилен.
Анализ пленки является стандартным инструментом анализа на
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео