Многолуночный анализ на жидкостной основе для скрининга нокдаунов C. elegans

0 views • 2:35 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Возьмите многолуночный планшет, содержащий агаровую среду, предварительно пятнистую РНК-интерференцией, с ген-специфичной вставкой, нацеленной на ген C. elegans , или без нее.

Семена синхронизировали червей L1-стадии в лунках и инкубировали их, чтобы обеспечить питание РНК-интерференционными бактериями.

Вставка производит интерферирующую РНК, которая нацелена на конкретные гены червей, генерируя ген-специфичный фенотип нокдауна.

Добавьте буфер в лунки и аккуратно восстановите суспендию червей.

Перенесите суспензию в глубоколуночную пластину и дайте червям осесть под действием силы тяжести.

Удалите надосадочную жидкость, сохранив при этом некоторый буфер.

Промойте червей буфером, затем выбросьте надосадочную жидкость, оставив небольшое количество буфера.

Далее возьмите многолуночный планшет для анализа, содержащий болезнетворные бактерии.

Внесите определенное количество контрольных и нокдаун-червей в соответствующие лунки, чтобы обеспечить взаимодействие хозяина и патогена. Патогенные бактерии выделяют соединения, которые вызывают смертность глистов.

Сравните смертность червей, чтобы оценить влияние ген-специфического нокдауна на выживаемость червей.

Добавьте один миллилитр S базала в лунку 24-луночного планшета, содержащего 300 червей на лунку. Осторожно взбалтывайте червей, встряхивая пластину, затем переложите червей в пустую, стерильную пластину глубиной 24 лунки.

Дайте червям осесть гравитационно, около пяти минут. Аспирируйте надосадочную жидкость, оставляя примерно один миллилитр на лунку, затем добавьте по 7 миллилитров S базала в каждую лунку. Повторите промывание еще два раза, а затем после последнего промывания аспирируйте все, кроме примерно 400 микролитров надосадочной жидкости.

После пипетирования бактерий в 384-луночные планшеты, чтобы избежать голодания, используя функцию повторного отбора проб сортировщика червей, отсортируйте 22 червя в каждую лунку 384-луночного планшета. Наконец, после сортировки добавьте небольшие молекулы или другие материалы, специфичные для эксперимента.

11:31

Создание установки с высокой пропускной способностью для скрининга малых молекул, которые модулируют с-ди-GMP Передача сигналов в Синегнойной

Related Videos

0 Views

11:58

Нематоды Caenorhabditis Elegans - универсальный в Vivo модель для изучения хост микробных взаимодействий

Related Videos

0 Views

11:40

Высокопроизводительный скрининг микробных изолятов с воздействием на здоровье Caenorhabditis elegans

Related Videos

0 Views

14:53

Высокопроизводительный скрининг и биодатчиков с люминесцентными С. Элеганс Штаммы

Related Videos

0 Views

09:40

RNAi скрининга для выявления Постэмбриональное фенотипы в С. Элеганс

Related Videos

0 Views

10:58

Количественные и автоматизированных высокой пропускной генома RNAi экраны в С. Элеганс

Related Videos

0 Views

03:15

Кормление РНК-интерференцией в жидкой культуре: высокопроизводительный метод подавления экспрессии генов у C. elegans

Related Videos

0 Views

06:28

C. Элеганс Анализ хемотаксиса

Related Videos

0 Views

18:38

Крупномасштабная Нокдаун гена в С. Элеганс Использование дцРНК кормления библиотек для генерации Прочные с потерей функции фенотипов

Related Videos

0 Views

11:43

Скринируемый В Vivo Анализ митохондриальных Модуляторы с использованием трансгенных БИОЛЮМИНЕСЦЕНТНЫЕ Caenorhabditis Элеганс

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026