Экспрессия люминесцентного оперона у морских биолюминесцентных бактерий
Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:14 мин. • September 26th, 2025
Начнем с морского биолюминесцентного бактериального штамма, несущего люминесцентный оперон, который кодирует люциферазу и ферменты, необходимые для синтеза субстрата.
Нанесите нагрузку на богатую питательными веществами агаровую пластину, дополненную искусственной морской водой, чтобы имитировать естественную соленость и поддержать рост.
Инкубируйте для получения дискретных колоний, затем изолируйте и инокулируйте одну колонию в жидкую среду, содержащую искусственную морскую воду.
Инкубируйте с перемешиванием, чтобы стимулировать мгновенный рост в экспоненциальной фазе.
Перенесите определенный объем ночной культуры в свежую среду и инкубируйте ее для увеличения бактериальной плотности.
По мере расширения популяции бактерии выделяют аутоиндукторы, сигнальные молекулы, которые накапливаются и диффундируют в клетки, где связываются с внутриклеточными рецепторами, активируя люминесцентный оперон.
Эта активация индуцирует экспрессию люциферазы и биосинтез субстрата.
Люцифераза катализирует окисление субстрата, излучая сине-зеленый свет.
Мониторинг культуры на биолюминесценцию как индикатор активации люминесценции оперонов и светового излучения у морских бактерий.
После подготовки среды в соответ
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео