Микроскопический анализ роста бактерий под воздействием стресса с использованием микрофлюидных камер

Начните с микрофлюидной пластины, заполненной предварительно подогретой питательной средой.

Прикрепите пластину к системе коллектора и запечатайте установку. Пропустите среду через каналы, чтобы удалить любые пузырьки воздуха.

Поместите установку на предметный столик для микроскопа и нагрейте ее, чтобы предотвратить расширение пластины во время визуализации.

Далее удалите среду, введите бактериальную культуру во входные отверстия клеток, а в входные отверстия раствора – среду, вызывающую стресс.

Стресс-индуцирующая среда содержит антибиотик, который останавливает деление клеток, не препятствуя увеличению клеточной массы.

Запечатайте систему, затем инициируйте загрузку клеток, чтобы перенести бактерии в культуральную камеру планшета.

Используя проходящий свет, найдите поле зрения, содержащее равномерно распределенные отдельные ячейки.

Введите в камеру среду, вызывающую стресс, чтобы подвергнуть клетки воздействию антибиотика.

Используя фазовый контрастный режим, делайте покадровые снимки для наблюдения за образованием удлиненных нитевидных клеток с повышенным содержанием ДНК, вызванным антибиотико-опосредованным ингибированием деления клеток.

Сначала удалите консервирующий раствор с микрофлю