Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:09 мин. • September 26th, 2025
Начните с культурального планшета, содержащего образец штамма бактерий.
С помощью стерилизованной инокуляционной иглы подберите изолированную колонию.
В стерильных условиях проводят пункцию-инокуляцию этой колонии в полутвердую среду с добавлением бесцветного окислительно-восстановительного красителя. Полутвердая среда ограничивает пассивную диффузию бактерий.
Подготовьте контрольные трубки, отрицательный контроль с неподвижным бактериальным штаммом, лишенным жгутиков, и положительный контроль с высокоподвижным штаммом жгутиковых бактерий.
Инкубируйте все инокулированные пробирки, чтобы поддержать рост и подвижность бактерий.
Во время инкубации метаболически активные бактерии восстанавливают бесцветный окислительно-восстановительный краситель до нерастворимого продукта красного цвета.
Подвижные бактерии размножаются и мигрируют через полутвердую среду с помощью своих жгутиков, создавая диффузную красную зону, расходящуюся наружу в окружающую среду.
Неподвижные бактерии размножаются, но не мигрируют; Красная зона остается ограниченной местом прокола.
Это позволяет визуально различать неподвижные и подвижные штаммы бактерий.
Соберите отдельные колонии бактерий из агаровых пластин и введите их в обе полутвердые среды путем прокола с помощью инокуляционных игл. Не забывайте включать немодальные деформации в качестве отрицательного контроля и модальные деформации в качестве положительного контроля.
Инкубируйте пробирки при температуре 37 градусов Цельсия и наблюдайте за результатами через 24–48 часов инкубации. Если только линия прокола красная, охарактеризуйте бактерии как немодальные.
Если красный цвет распространяется наружу по линии прокола, характеризуйте бактерии как модальные.