Изотермическая микрокалориметрия для мониторинга метаболической активности бактерий

Возьмите серийные разведения бактериальной культуры и добавьте аликвоты в калориметрические флаконы, содержащие питательную среду.

Загрузите герметичные флаконы в многолуночный планшет изотермического микрокалориметра для измерения выработки метаболического тепла.

Устройство поддерживается при постоянной температуре, чтобы гарантировать, что обнаруженное тепло происходит исключительно в результате бактериального метаболизма.

По мере того, как бактерии усваивают питательные вещества и размножаются, они выделяют тепло, которое датчики обнаруживают в режиме реального времени.

Параллельно инкубируйте в инкубаторе идентичные флаконы. С помощью спектрофотометра измерьте оптическую плотность (OD) для мониторинга роста бактерий.

Используя калориметрические сигналы от разведений, построить кривую тепловой активности и соотнести ее со значениями OD.

Резкий первый пик указывает на аэробное дыхание во время экспоненциального роста.

По мере того, как содержание кислорода становится ограниченным, клетки переходят к анаэробному брожению, производя второй резкий пик.

При вступлении в стационарную фазу бактерии выделяют ферменты для расщепления внеклеточных белков и поддержания метаболизма, производя широк