JoVE Encyclopedia of Experiments
Микробиология
0 просмотров • 2:28 мин • October 30th, 2025
Начните со стеклянной покровной чашки, засеянной кокультурой подвижных бактерий с флуоресцентной меткой и немеченых неподвижных бактерий.
Возьмите блюдо, содержащее питательную агарозную подушечку, и осторожно удалите окружающую ее силиконовую форму.
Наклоните блюдо и с помощью изогнутой лопатки проскользните под край подушечки. Затем поместите его на крышку тарелки Петри.
Перенесите подушечку нижней стороной вниз на чашку, содержащую бактериальные клетки, чтобы обеспечить равномерный контакт с бактериальным слоем.
Аккуратно нажмите на подушечку, чтобы устранить пузырьки воздуха.
Поместите предварительно смоченные салфетки по краю посуды для поддержания влажности.
Под перевернутым микроскопом отслеживайте поведение бактерий в течение определенного периода времени.
По мере роста бактерий неподвижные бактерии выделяют химические аттрактанты. Подвижные бактерии чувствуют эти сигналы и движутся к неподвижным колониям бактерий.
Со временем подвижные бактерии накапливаются и вторгаются в неподвижные колонии бактерий, подтверждая бактериальное взаимодействие.
Как только подушечки высохнут, равномерно нанесите пипеткой один микролитр сокультуры на дно предварительно нагретой стерильной стеклянной чашки диаметром 35 мм.
Извлеките силиконовый вырез из агарозной формы с помощью стерильного пинцета, наклоните его в сторону и просуньте слегка согнутый шпатель под край агарозной подушечки, чтобы опустить ее на стерильную крышку тарелки Петри.
Перенесите прокладку в чашку с бактериальными клетками нижней стороной вниз, просунув лопатку под углом 90 градусов под прокладку и положив ее поверх привитой крышки. Используйте шпатель, чтобы подушечка плотно прилегала к крышке, соскользнула и осторожно выдавите все пузырьки воздуха.
Удалите лишнюю влагу с влажной салфетки и поместите ее по краю блюда, следя за тем, чтобы она не касалась подушечки. Теперь образец готов к визуализации.