Измерение связывания препарата с казеумом из пораженных туберкулезом методом быстрого равновесного диализа

Возьмем однородную суспензию казеума — некротического, богатого липидами материала из поражений туберкулеза, в основе которого лежат устойчивые к лекарствам микобактерии.

Добавляйте испытуемый препарат в гомогенат и вихрь, чтобы облегчить его взаимодействие с казеумной матрицей.

Поместите в опорную пластину быструю равновесную диализную вставку, содержащую донорскую и реципиентную камеры, разделенные полупроницаемой мембраной.

Загрузите гомогенат с лекарственным препаратом в донорскую камеру и добавьте буфер в приемную камеру.

Запечатайте пластину и инкубируйте с вращением.

Во время инкубации свободный препарат диффундирует по мембране, достигая равновесия между обеими камерами.

Как только равновесие будет достигнуто, разбавьте донорский образец буфером, а образец реципиента — гомогенатом, не содержащим лекарств, чтобы нормализовать матричные условия для количественного определения лекарственного средства.

Наконец, количественно определите концентрацию препарата и рассчитайте несвязанную фракцию препарата или fu.

Фу отражает свободное лекарство, доступное для диффундирования в казеум и достижения устойчивых к лекарствам микобактерий.

Добавьте 6,5 микролитров приготовленного исследуемого сос