Количественное определение колониеобразующих единиц кишечно-ассоциированных бактерий у мух дрозофил

Начните с микропланшета, содержащего гомогенаты, приготовленные из мух дрозофилы . Эти мухи содержали в своем кишечнике контролируемую популяцию определенной бактерии.

Гомогенаты содержат лизированные ткани мухи и высвобожденные кишечные бактерии.

Аспирируйте взвешенные бактерии и последовательно разбавляйте на нескольких микропланшетах.

Наносите небольшие объемы из каждого разбавления на агаровые пластины, следя за тем, чтобы капли оставались разделенными.

Инкубируйте, чтобы позволить бактериям размножаться в видимые колонии.

Сделайте снимки планшетов для количественного определения колониеобразующих единиц (КОЕ), которые представляют собой количество жизнеспособных бактериальных клеток, способных образовывать отдельные колонии.

Используя программное обеспечение для анализа изображений, выровняйте каждое изображение по опорной линии, определите границу и примените единую сетку, чтобы разделить его на зоны подсчета, каждая из которых соответствует одному пятну.

Отрегулируйте порог яркости, чтобы отличить отдельные колонии от фона, затем запустите анализ, чтобы подсчитать колонии в каждом месте и количественно определить КОЕ.

Поместите три прямоугольные пластины роста агара MRS с открытыми