Подготовка культуры Streptococcus mitis для изучения взаимодействия хозяина и патогена

Начните со стерильного экстракта дрожжей Тодда-Хьюитта, или агаровой пластины THY, богатой питательными веществами среды, которая поддерживает рост Streptococcus mitis, патогенной бактерии.

С помощью стерильной петли прорежьте пластину бактериальным штаммом.

Поместите инокулированную тарелку в банку для свечей, зажгите свечу, герметично закройте банку и инкубируйте.

Горящая свеча потребляет кислород и повышает уровень углекислого газа, создавая микроаэрофильную среду, которая имитирует условия, подобные условиям хозяина.

Питательные вещества в среде и микроаэрофильной среде банки усиливают размножение бактерий и способствуют развитию фенотипа вирулентности.

После инкубации снимите крышку банки и достаньте тарелку.

С помощью стерильной петли выберите одну изолированную колонию и перенесите ее в стерильную коническую пробирку, содержащую бульон THY.

Инкубируйте культуру в статических условиях, чтобы поддержать рост бактерий с сохранением фенотипа вирулентности.

Эта культура может быть использована в качестве патогенной модели для исследования взаимодействия хозяина и патогена.

Перед приготовлением стрептококков Mitis Group прогрейте агаровые пластины THY в инкубаторе до 37 градусов Цельсия.

После этого используйте стерильную петлю, чтобы выделить желаемые штаммы Streptococci на пластинах.

Затем поместите тарелки в банку для свечей и инкубируйте банку при температуре 37 градусов Цельсия в течение ночи в течение примерно 18 часов, чтобы обеспечить микрофильную среду.

На следующий день выньте тарелки из банки со свечами и с помощью стерильной петли выберите изолированные колонии.

Инокулируйте 15 миллилитров стерильных конических пробирок, содержащих 2 миллилитра THY бульона.

Плотно закройте крышки и инкубируйте пробирки при температуре 37 градусов Цельсия в статических условиях.