Культивирование нетипируемых Haemophilus influenzae

Начните с нетипизируемого штамма Haemophilus influenzae , патогена дыхательных путей человека.

Нанесите бактериальную культуру на богатую питательными веществами селективную среду и инкубируйте ее в условиях, обогащенных_CO2, чтобы имитировать среду дыхательных путей.

Во время инкубации бактерии утилизируют питательные вещества и размножаются, образуя колонии.

Переведите колонию в селективную жидкую среду и инкубируйте, чтобы стимулировать рост бактерий в жидкой культуре.

Переложите аликвоту в микроцентрифужную пробирку.

Центрифуга, чтобы отделить бактерии и избавиться от надосадочной жидкости.

Повторно суспендируйте бактерии в буфере, снова центрифугируйте для промывки и отделения бактерий и выбросьте остаточную средусодержащую надосадочную жидкость.

Ресуспендируйте бактерии в буфере и разбавьте.

С помощью спектрофотометра измерьте оптическую плотность на длине волны 600 нм, чтобы оценить концентрацию бактерий.

Поместите разведенную бактериальную культуру на селективную среду и инкубируйте для формирования колоний.

Подсчитайте колонии, чтобы рассчитать колониеобразующие единицы для подготовки инокулята к будущему использованию.

Выложите NTHI на тарелку с шоколадным агаром. Инкубируйте тарелку