Синхронизация культур цианобактерий и уплотнение ДНК на основе циклов «свет-темнота»
Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:17 мин. • October 30th, 2025
Начните с богатой питательными веществами агаровой пластины, дополненной тиосульфатом.
Размножите цианобактерии и инкубируйте их в чередующиеся светлые и темные периоды, чтобы поддерживать циркадный цикл.
В течение светового периода поглощение питательных веществ и тиосульфат поддерживают рост бактерий и конденсацию ДНК.
В темный период клетки сохраняют энергию и делятся.
Чередующийся цикл света и темноты синхронизирует клетки с одной и той же стадией роста и деления.
После светового периода добавьте раствор сахарозы и несколько раз проведите пипетку, чтобы выпустить цианобактерии, вызывающие изменение цвета. Переложите клетки в трубку.
Добавьте специфичный для ДНК флуоресцентный краситель и инкубируйте в темноте. Краситель связывается с ДНК цианобактерий.
Центрифуга отделит цианобактерии и удалит надосадочную жидкость.
Повторно суспендируйте цианобактерии в растворе сахарозы, переложите суспензию на предметное стекло и накройте ее.
Под флуоресцентным микроскопом синяя конденсированная ДНК в клетках подтверждает синхронизированную, регулируемую циркадиями прогрессию клеточного цикла цианобактерий.
Начните с выращивания цианобактерий на девятисантиметровых, стерилизованных пластинах BG-11, со
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео