Культивирование быстрорастущей бактерии Vibrio natriegens

Возьмите пробирку, содержащую культуру Vibrio natriegens, быстрорастущей бактерии.

Центрифугируйте культуру для гранулирования бактерий. Выбросьте надосадочную жидкость, содержащую остаточную среду.

Повторно суспендируйте бактериальную гранулу в свежей среде и переложите ее в коническую колбу, содержащую ту же среду для приготовления бактериальной культуры.

Инкубируют культуру с встряхиванием в проветриваемых условиях.

Из-за короткого времени генерации Vibrio natriegens использует питательные вещества и быстро делится, образуя концентрированную бактериальную популяцию.

С помощью спектрофотометра регулярно контролируйте оптическую плотность (OD) для определения концентрации бактерий.

Выращивайте культуру до тех пор, пока OD не достигнет примерно единицы, что указывает на экспоненциальную фазу роста с высокой метаболической активностью.

Переложите культуру в центрифужные пробирки.

Центрифуга при низкой температуре, чтобы отделить бактерии с сохранением клеточной целостности.

Поместите трубку на лед и удалите надосадочную жидкость, содержащую клеточный мусор.

Храните бактериальную гранулу при сверхнизкой температуре для последующего анализа.

Для начала промойте один миллилитр культуры Vibrio nat