Подвижность скольжения у нитей Phormidium lacuna

Начните с культуры нитями Phormidium lacuna .

Кратковременно гомогенизируйте культуру, чтобы разбить кластеры нитей и получить однородную суспензию.

Перенесите гомогенизированный образец в тарелку Петри и дайте ему отдохнуть.

Накройте тарелку целлофаном, чтобы уменьшить испарение.

Поместите предметное стекло на предметное стекло в качестве опорной платформы.

Поместите пластину с образцом непосредственно на предметное стекло.

Используйте маломощную линзу объектива и сфокусируйтесь на бактериальных нитях, взвешенных в среде, чтобы наблюдать за их движением.

Нити демонстрируют медленное, скользящее движение по поверхности, приводимое в движение пили типа IV — микроскопическими волокнами, собранными на внутренней мембране и выходящими через внешнюю мембрану.

Эти волокна вытягиваются и втягиваются, чтобы вытянуть клетки вперед, позволяя им скользить.

Этот анализ выявляет характерную скользящую подвижность Phormidium lacuna в жидкой среде.

Культивируйте P. lacuna в среде F2 при горизонтальном перемешивании со скоростью 50 об/мин в белом свете в течение примерно пяти дней, пока расчетная оптическая плотность на 750 нанометрах не станет 0,35. Храните образец при температуре четыре градуса Цельсия. Гомогенизируйте нити ультразвуком в течение одной минуты при максимальной мощности и цикле в один цикл.

Измерьте оптическую плотность на 750 нанометрах и перенесите восемь миллилитров среды, содержащей P. lacuna, в шестисантиметровую чашку Петри. Подождите несколько минут, пока образец нагреется до комнатной температуры, а затем накройте чашку Петри целлофановой фольгой. Поместите предметное стекло микроскопа на X-Y стол стандартного микроскопа с камерой.

Включите свет микроскопа и переместите объектив с 4X или 10X на траекторию света. Затем поместите чашку Петри на горку. Отрегулируйте отдельные нити или пучки нитей с помощью движений стола по осям X, Y и Z.

Наблюдайте за движениями отдельных нитей или пучков и записывайте движения с помощью стандартной камеры микроскопа. Следите за тем, чтобы линза объектива не соприкасалась с жидкостью.