Подготовка бактериальных наноцеллюлозных пелликул из бактерий, производящих целлюлозу

Возьмите микропластинку, наполненную питательной средой с маннитолом.

Инокуляруйте каждую скважину бактерией, производящей целлюлозу, и инкубируемые в статических условиях.

Во время инкубации бактерии поглощают маннитол и метаболизируют его в глюкозу.

Эта глюкоза транспортируется в комплексы целлюлозы-синтазы, встроенные в мембрану бактерии, и полимеризуется в глюкановые цепи.

Эти цепи выходят во внеклеточное пространство, где кристаллизуются в микрофибриллы.

Микрофибриллы связываются в лентовидные структуры, образуя трёхмерную наноцеллюлозную матрицу.

По мере получения большего количества наноцеллюлозы она накапливается на границе воздух-жидкость, утолщаясь в желеобразные пелликулы, формованные в форму колодца.

Собрать пелликулы и инкубировать их в щелочном растворе для лиза бактериальных клеток, затем удалить остаточную среду.

Многократно промывайте пелликулы водой, чтобы удалить остатки щелочного раствора. Храните пелликулы в воде, чтобы предотвратить обезвоживание. Затем стерилизуйте их паром для обеспечения стерильности для дальнейших применений.

Пересадите по два миллилитра жидкой культурной среды в каждую скважину 24-колодной пластины для культивирования. Берите две колонии с иглой д