Подготовка образцов Myxococcus xanthus для изображения живых клеток

Начните с культуры Myxococcus xanthus — медленнорастущей почвенной бактерии.

Инокулировать колонию в среду с добавлением антибиотика.

Клетки были спроектированы так, чтобы сопротивляться антибиотику, обеспечивая выживание только желаемых бактерий.

Переложите суспензию в большую колбу с материалом и инкубуйте с помощью встряхивания, чтобы способствовать оптимальному росту.

Возьмите накладку, установленную на металлической раме, которая обеспечивает механическую поддержку при съёмке.

Нанесите бактериальную культуру на него, затем добавьте флуоресцентные микросферы, чтобы они служили точками отсчёта для выравнивания изображения при получении нескольких изображений.

Положите заранее подогретую агарозную подушечку с этим материалом, затем накройте её покрытием для поддержания увлажнения.

Инкубировать, чтобы клетки могли прилипнуть к агарозной подушечке.

Подушечка снабжает клетки питательными веществами, позволяя долгосрочно снимать живые клетки процессы во время пролиферации в медленнорастущей бактерии.

Для начала повторно суспензировать одну колонию M. xanthus в 500 микролитрах 1% CTT, с добавлением антибиотиков, в стерильную трубку и перенести всю суспензию в 50-миллилитровую колбу Эрленмайера