Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:10 мин. • November 28th, 2025
Инокулировать культуру, содержащую как сальмонеллу , так и не-сальмонеллы виды, в селенитовую цистинную среду и инкубировать.
Селенит подавляет рост бактерий, чувствительных к селену, нарушая их метаболические процессы.
Однако бактерии, устойчивые к селену, включая сальмонеллу, могут метаболизировать селенит и расти.
Нанесите посев на Xylose лизин дезоксихолат или XLD agar и инкубируете.
Сальмонелла восстанавливает тиосульфат натрия в агаре XLD до сероводорода, который реагирует с железными ионами в среде, образуя чёрный сульфид железа, образуя колонии с чёрными центрами.
В отличие от этого, виды, не связанные с сальмонеллой , не производящие сероводород, образуют колонии без чёрных центров, что позволяет визуально отличиться от сальмонеллы.
Выберите колонию с чёрным центром и разнесите её на хромогенный агар Salmonella для повышения специфичности.
Хромогенный агар содержит субстраты, специфические для сальмонелло, ферменты, связанные с хромофорами.
Ферменты сальмонеллы расщепляют эти субстраты, высвобождая хромофоры и формируя пигментированные колонии.
Выберите эти колонии для дальнейшего анализа.
Добавьте 100 микролитров культуры предварительного обогащения в пять миллилитров селенитовой кристаллической среды. Затем инкубировать культуру при 36 градусах Цельсия в течение 18–24 часов. Далее соберите одну петлю культуры и распределите её на тарелке.
Затем инкубировать пластину при 36 градусах Цельсия в течение 18–24 часов. После инкубации выберите подозрительные колонии и перенесите их на пластину. Инкубировать тарелку при 36 градусах Цельсия в течение 18–24 часов.