Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:42 мин. • January 30th, 2026
Начните с добавления раствора с бактериальными 16S рРНК-специфическими флуоресцентными зондами (FISH) к стеклу, содержащему кишечные секции мыши, заселенные бактериями.
Установите накладку, чтобы распределить жидкость с зондами и предотвратить испарение.
Инкубировать затвор в увлажнённой камере при повышенной температуре.
Это раскрывает вторичную структуру РНК, способствуя гибридизации зонда с комплементарными последовательностями в бактериальной рРНК 16S.
Снимите накладку и поместите затвор в предварительно подогреный буфер для стирки, чтобы удалить незавязанные зонды.
Прополосните фосфатным буфером для поддержания физиологического pH.
Нанесите противокраску с специфическим для слизи красителем и ядерным красителем и инкубируете.
Эти красители избирательно связываются с кишечной слизью и с ДНК бактериальных и хозяинских клеток. Промой затвор буфером и крепи крышки с помощью монтажного материала.
Под конфокальным микроскопом наблюдайте отдельные бактерии с маркировкой FISH, кишечные клетки и слизистые слои внутри срезов.
Создайте очень плотные круги вокруг каждого среза ткани с помощью жидкого блокатора или PAP-пера, чтобы ограничить область расширения, необходимую для покрытия раствором ги
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео