JoVE Encyclopedia of Experiments
Микробиология
0 просмотров • 2:02 мин • January 30th, 2026
Начните с мухи Drosophila , ранее инфицированной бактериальным патогеном, колонизирующим кишечник.
Переместите муху в стерильную трубку с кормом для мух.
Оставляйте муху в безопасности, чтобы она питалась едой.
Внутри кишечника мухи патогенные бактерии используют питательные вещества из пищи и размножаются.
Когда муха выделяется, некоторые бактерии также выделяются.
После определённого периода переместите муху в свежую трубку с едой и повторите процесс несколько раз.
Затем выбросьте муху из последней трубки.
Добавьте буфер в каждую трубку и вихрь для выделения бактерий из экскрементов мух.
Подготовьте последовательное разбавление восстановленного раствора из каждой трубки.
Разбавленные растворы нанесите на питательную агарную пластину и инкубируете, чтобы бактериальные колонии могли расти.
Подсчитайте колонии, чтобы определить количество жизнеспособных бактерий, выделяемых заражённой мухой со временем, что отражает её потенциал для передачи инфекции.
Для измерения выделения бактерий перенесите одиночных мушек в трубки объемом 1,5 миллилитра с примерно 50 микролитрами среды Льюиса.
Меняйте трубку каждые 24 часа. После того как три трубки будут заполнены на 24 часа, избавляйтесь от мух. После каждого переноса измеряйте количество бактерий, содержащихся в пробирке.
Смешайте содержимое трубки со 100 микролитрами PBS с помощью вихря. Затем измеряйте количество CFU в смеси, нанося серийные разбавления.