Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:24 мин. • February 2nd, 2026
Начинайте с анестезированной мыши с двумя полноразмерными кожными ранами на спине, при этом эпидермальные и дермальные слои будут удалены хирургически.
Прозрачная плёнка покрывает раны, чтобы изолировать место и предотвратить внешнее загрязнение.
Позвольте мыши восстановиться в течение определённого времени.
В это время кровь с разными компонентами попадает в рану. Это активирует тромбоциты, запуская формирование временного матрикса, состоящего из фибрина, фибронектина и протеогликанов, и инициирует образование тромбова.
Повторно анестезируйте мыши и введите физиологический раствор в каждую сторону для поддержания гидратации.
Затем введите определённую дозу люминесцентного штамма Pseudomonas aeruginosa через пленку в каждую рану.
Бактерии оседают внутри временной матрицы, которая поддерживает их прикрепление и рост.
Вместе матрица и пленочная повязка создают благоприятные условия для образования биопленки, что приводит к локализованной хронической инфекции.
Записывайте люминесценцию для мониторинга бактериальной инфекции.
Через 24 часа после операции снова взвесьте повторно анестезиированную мышь и введите животному подкожно 250 микролитров предварительно нагретого стерильного хлорида натрия 0,9% в обе стороны.
Затем загрузите 100 микролитров люминесцентной суспензии P. aeruginosa в 500-литровый туберкулиновый защитный шприц с иглой 27-го калибра и введите 40 микролитров бактериальной суспензии через прозрачную плёнку в каждую рану.
Убедитесь, что бактериальная суспензия хорошо смешана и прозрачная повязка цела. Обязательно проколите прозрачную повязку иглом только один раз, скошенной стороной вверх.
Затем верните мышь в клетку на грелке с контролем и поставьте высококалорийную пищевую пасту, зажатую между пищевыми гранулами на полу клетки.