Живое изображение гибели макрофагов клеток во время микобактериальной инфекции у эмбрионов данио-рерио.
Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:29 мин. • February 2nd, 2026
Начните с трансгенных эмбрионов данио-рерио, экспрессирующих флуоресцентно маркированные макрофаги, размещённые в низкоплавящей агарозе в изображенной чаше.
Эти эмбрионы инфицируются флуоресцентно маркированным Mycobacterium marinum путём внутримышечной микроинъекции в средний мозг, запуская локализованный иммунный ответ.
Покрыть затвердевшую агарозу эмбриональной средой с анестетиками для поддержания анестезии и химическими ингибиторами для подавления пигментации, обеспечивая оптическую чистоту для визуализации.
Поставьте тарелку в камеру высокоразрешающего конфокального микроскопа.
Используя яркое освещение, определите заражённую область.
Активируйте флуоресцентные лазерные каналы, установите начальную и конечную позиции Z-стека и запустите таймлапс-съёмку.
Визуализируйте заражённый макрофаг, наполненный флуоресцентными бактериями, когда он становится округлым и неподвижным.
Это указывает на разрушение цитоскелета и начало гибели литических клеток.
Со временем макрофаг набухает и разрывается, высвобождая цитоплазматическое содержимое и внутренне поглощённые бактерии в окружающую ткань — признак воспалительной гибели литических клеток.
Когда агароза полностью затвердеет, накройте её слоем
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео