Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 3:42 мин. • January 30th, 2026
Начните с механической диссоциации селезёнки новорождённых мышей для создания одноклеточной суспензии.
Перенесите подвеску в трубку, установите центрифугу и удалите супернатант.
Суспензировать гранулу в буфере лизис, чтобы устранить эритроциты.
Добавьте буфер, снова центрифугу и удалите супернатант.
Ресуспензировать клетки в буфере и инкубировать с помощью магнитных микробусин, покрытых антителами, направленных на рецептор, экспрессируемый на нейтрофилах и воспалительных моноцитах.
Центрифугуйте и удалите незавязанные шарики. Добавьте буфер, затем пропустите подвеску через ферромагнитную колонку и примените магнитное поле для удержания элементов, связанных с шариками.
Удалить магнитное поле, элюировать клетки буфером и засеять их в многоколодную пластину.
Добавляйте увеличивающиеся концентрации люминесцентных бактерий в выбранные скважины.
Инкубируйте, чтобы нейтрофилы и моноциты могли внутреннее поглощение бактерий через фагоцитоз.
Замените среду на субстрату с антибиотиками, чтобы устранить неинтернализированные бактерии.
Фиксировать люминесценцию с регулярными интервалами для оценки интернализации бактерий и последующего уничтожения, вызванного фагоцитозом.
Для проведения экстракорпорально
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео