Визуализация бактериальной инфекции в модели мыши с использованием биолюминесценции в реальном времени

Возьмём анестезиированную мышь, предварительно инфицированную патогенным бактериальным штаммом, созданным для экспрессии генетически интегрированного биолюминесцентного оперона.

Оперон кодирует люциферазу и мультиферментный комплекс, синтезирующий его субстрат.

Фермент люцифераза катализирует реакцию с этими субстратами, производя видимую люминесценцию.

Разместите мышь в положении на спине на стабилизированной температуре камеры визуализации и поддерживайте анестезию во время визуализации.

Используйте систему визуализации для захвата как биолюминесцентных, так и соответствующих рентгеновских изображений мыши.

Биолюминесцентное изображение показывает степень бактериальной инфекции, а рентгеновское изображение служит анатомическим ориентиром для локализации инфекции.

После съёмки верните мышь в клетку и дайте возможность восстановления.

Фиксировать биолюминесцентные изображения с регулярными интервалами для отслеживания прогрессирования бактериальной инфекции в реальном времени.

Со временем наличие биолюминесцентных сигналов в различных местах подтверждает распространение инфекции по всему хозяину.

Для съёмки животных подготовьте систему съёмки, установив параметры камеры и нагрев сцену. Установите поток кислорода на 1,5 литра в минуту, а изофлурана на 3,5% и переведите мышь в анестетическую камеру, затем на стабилизированную стадию температуры после анестезии. Положите мышь на спину с вытянутыми руками и установите носовой конус для введения 2,5% изофлурана во время визуализации.

Закройте дверь и сделайте биолюминесцентные снимки и рентгеновские снимки мыши. Когда съёмка завершена, верните мышь в клетку и следите за ней. Он должен прийти в сознание через 3–5 минут.