Внутрибрюшинная инъекция бактериального липополисахарида у мышей для изучения системных иммунных ответов

Начните с бодрствующей мыши, удерживаемой так, чтобы ограничить её движение.

Наклоните голову вниз, чтобы обнажать нижнюю часть живота.

Определите среднюю линию брюшной полости и немного смещённое место инъекции, чтобы избежать внутренних органов.

Далее возьмите шприц с раствором липополисахаридов — компонента грамотрицательной оболочки бактериальных клеток.

Введите иглу в участок для доступа к брюшной полости и введите раствор.

После инъекции ЛПС попадает в системный кровообращение и запускает иммунный ответ.

В кровотоке LPS связывается с белком, связывающимся с LPS, который переносит его в CD14 — мембранный белок иммунных клеток.

CD14 доставляет LPS к MD-2 — гликопротеину, который ассоциируется с рецептором-подобным Toll 4 (TLR4), что обеспечивает димеризацию TLR4.

Димеризированный TLR4 привлекает адаптерные белки, активирующие сигнальные пути вниз по потоку, вызывая экспрессию воспалительных цитокинов и системное воспаление.

Это моделирует микробную транслокацию и системную иммунную активацию в кишечнике и других органах, вызванную бактериальными продуктами.

Держите мышь аккуратно, но крепко и удержите животное одной рукой. Убедитесь, что мышь надёжно удерживается и может нормально дышать.

Слегка наклоните нос мыши к полу, чтобы обнажить живот для инъекции. Определите среднюю линию живота и введите необходимый объём ЛПС в нижнюю-левую или правую сторону.

Очень важно убедиться, что игла попадёт в брюшинную полость, чтобы избежать неправильных инъекций.

Игла также не должна проникать слишком глубоко в брюшинную полость, чтобы избежать повреждения внутренних органов.

Аккуратно верните животное в домашнюю клетку.

Следите за появлением и степенью тяжести эндотоксемии в момент инъекции и каждые 2 часа после этого в течение 8 часов. Запишите наблюдения в приложенном листе с результатами.