Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 1:33 мин. • January 30th, 2026
Возьмём культуры почечных клеток свиньи, при этом одна культура предварительно обработана ингибитором, повышающим pH лизосомы, ухудшая аутофагично-лизосомное разложение.
Добавьте патогенные бактерии и центрифугу для усиления контакта между хозяином и патогеном.
Инкубировать для обеспечения бактериального вторжения и внутренней интернации в эндоцитарные пузырьки.
Внутренние бактерии потребляют питательные вещества хозяина для репликации, вызывая метаболический стресс.
Этот стресс активирует аутофагию, когда аутофагическая мембрана расширяется вокруг везикулы, образуя аутофагосому.
В необработанных клетках аутофагосома нацеливается на бактерии для дезградации лизосом.
В клетках, обработанных ингибиторами, аутофагический клиренс нарушается, что приводит к увеличению бактериальной нагрузки.
После заражения промыйте клетки и нанесите антибиотик для уничтожения внеклеточных бактерий.
Добавьте фермент для переваривания внеклеточного матрикса и удаления клеток.
Механически лизируйте клетки, чтобы выпустить внутриклеточные бактерии.
Покройте лизаты в пластину, чтобы обеспечить рост бактерий.
Меньшее количество колоний из необработанных клеток подтверждает роль пути деградации аутофагии-лизосомного разложения в очищении внутриклеточных бактерий.