JoVE Encyclopedia of Experiments
Микробиология
0 просмотров • 1:28 мин • January 30th, 2026
Начните с загрязнённой воды, в которой, вероятно, содержатся фекальные колиформы, включая E. coli.
Проведите последовательное разбавление дистиллированной воды для снижения мутности и микробной нагрузки.
Смешайте нужный разбавленный образец с питательной средой и загрузите его в микрофлюидный чип.
Используйте вакуумную фильтрацию для захвата бактерий на мембране внутри серпантинного канала чипа.
Добавьте питательную среду в верхнюю камеру и инкубировать для улучшения восстановления бактерий.
Замените среду раствором фагов, специфичных для E. coli, несущего ген люциферазы.
Инкубировать для заражения фагов, при этом ДНК фага реплицируется, разрушает ДНК хозяина и формирует новые фаги вместе с выработкой люциферазы. Затем инфицированные клетки лизуются, высвобождая люциферазу.
Примените вакуумную фильтрацию для переноса люциферазы на захватную мембрану.
Добавьте подложку, которая реагирует с люциферазой, чтобы получить люминесцентный сигнал.
С помощью фотомультипликатора измеряйте люминесценцию, которая пропорциональна количеству жизнеспособных клеток E. coli в образце воды.