Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 1:20 мин. • February 26th, 2026
Возьмите культуры эпителиальных клеток человеческого мочевого пузыря в мультиколодящей пластине.
Инкубировать контрольную культуру с дикой типом Enterobacter cloacae — патогенной бактерией с пили — волоскообразными структурами на поверхности бактерий.
Субъединица пили FimH связывается с рецептором клетки-хозяина, закрепляя бактерии дикого типа к клетке-хозяину.
Инкубировать экспериментальную культуру с мутативной клоакой Enterobacter без FimH.
Без FimH мутантные бактерии не прилипают к клеткам хозяина.
После инкубации промывайте буфером для удаления несвязанных бактерий.
Добавьте буфер для лизисов и инкубуйте под возбуждением, чтобы нарушить работу клеток хозяина и высвободить прилипшие бактерии.
Последовательно разбавляйте лизаты, помещайте их на питательную среду и инкубируете.
Лизат из контрольной культуры даёт колонии, а лизат из экспериментальной культуры — нет, что подтверждает, что FimH необходим для адгезии бактерий к клеткам хозяина.