Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:46 мин. • February 26th, 2026
Начните с супернатанта, вырабатываемого микробиотой кишечника человека во время экстракорпоральной ферментации экзополисахаридов. Супернатант содержит депротонированные короткоцепочечные жирные кислоты (SCFA) и другие метаболиты.
Добавьте метафосфорную кислоту, чтобы снизить pH супернатанта, и вихрь для тщательного смешивания. Это преобразует SCFA в их протонированные формы, подходящие для анализа с помощью газовой хроматографии.
Центрифуга для разделения мусора и сбора супернатаната, содержащего SCFA и другие метаболиты.
Фильтруйте супернатант, чтобы устранить остаточный мусор и избежать помех с хроматографией.
В системе высокопроизводительной газовой хроматографии вводят супернатант в нагретый вход для испарения. Затем смешайте пар с инертным газом и пропустите его через полярную колонку стационарной фазы для разделения.
SCFAs взаимодействуют с неподвижной фазой колонки и разделяются в зависимости от летучей способности, при этом короткоцепочечные кислоты выделяются раньше, чем более длинные.
Определите концентрации различных SCFA, сравнивая результаты с внутренними стандартами. Это отражает микробное разложение экзополисахаридов при условиях, подобных кишечнику
Для изучения влияния EPS
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео