Количественное определение кишечной бактериальной нагрузки у данио-рерио, инфицированных холерой Vibrio

0 просмотров • 3:48 мин. • February 26th, 2026

Начните с взрослой данио-рерио, инфицированной антибиотикоустойчивым штаммом Vibrio cholerae. Эта патогенная бактерия экспрессирует фермент β-галактозидазы и колонизирует кишечник.

Соберите рыбу и переложите её в раствор с передозировкой анестетика для эвтаназии.

Положите рыбу вентральной стороной вверх и закрепите её булавками.

Продезинфицируйте брюшную полость, сделайте продольный разрез кожи и два боковых разреза в сторону головы, затем закрепите кожу, чтобы открыть кишечник.

Переместите тракт в трубку для гомогенизации с холодным буфером и стеклянными бусинами.

Инкубировать с помощью перемешивания, позволяя стеклянным бусинкам разрушать ткани и выпускать бактерии.

Последовательно разбавляйте гомогенат, накладываете его на среду и инкубируете. Среда содержит хромогенный субстрат β-галактозидазы и антибиотик для устранения загрязнителей.

Бактерии экспрессируют фермент β-галактозидазы, который гидролизирует хромогенный субстрат, способствуя образованию синих пигментных колоний.

Посчитайте колонии, чтобы оценить бактериальную нагрузку кишечника.

Когда эксперимент достигнет желаемой цели, возьмите 15-миллилитровую пробу воды для диагностики. Затем соберите рыбу и правильно утилизируйте зараж

Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео

Войти

Больше видео

Модель Danio rerio