Количественная оценка тканевой бактериальной нагрузки в модели хронической кишечной инфекции у мыши

0 views • 2:42 min • February 26th, 2026

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Начинайте с усыплённой мыши, инфицированной антибиотикоустойчивым бактериальным штаммом, который моделирует хроническую кишечную инфекцию.

Обнажите брюшную полость для доступа к слепной и селезёнке.

Извлеките ткани кекалий и селезёнки, которые представляют собой кишечные и системные участки колонизации бактерий.

Поместите каждую ткань в отдельную трубку с буфером и стальной шариком.

Гомогенизуйте ткань, быстро перемешивая трубки, вызывая столкновение стальных шариков с тканью, её разрушение и высвобождение бактерий в суспензию.

Проводите серийное разбавление гомогенатов в буфере для снижения концентрации бактерий.

Пластинчатые аликвоты из каждого разбавления на питательный агар с добавлением антибиотика для селективного восстановления устойчивых к антибиотикам бактерий.

Инкубировать пластины, чтобы жизнеспособные бактерии могли вырасти в колонии.

Подсчитайте колонии, чтобы оценить количество жизнеспособных бактерий на грамм ткани, и сравните бактериальную нагрузку в грудной и селезёнке.

Сначала разместите микротрубки с круглым дном с безопасным замком объемом 2 миллилитра, добавьте 1 миллилитр стерильного PBS и автоклавную бусину из нержавеющей стали в каждую трубку. Заранее взвесьте трубы перед сбором тканей.

После эвтаназии мышей удалять их ткани кекалий и селезёнки, обязательно собирая ткани отдельных животных в отдельные трубки. Взвесьте каждую трубку, чтобы определить вес тканей.

Используйте смесительный мельничный аппарат для гомогенизации тканей при 30 герц в течение 15 минут. Затем переведите 900 микролитров PBS в каждую скважину мегаблока объемом 2 миллилитра с 96 лунками. Пипет, 100 микролитров ткани, гомогенизируются в первую яму, и хорошо перемешиваются.

Проводите последовательные разбавления, добавляя 100 микролитров в последующие скважины, пока не получится разбавление 10 к минус шестой. Пластинка 10 микролитров каждого разбавления тройной разводится на LB-агар, содержащий стрептомицин. Затем подсчитайте среднее количество единиц формирования колонии и определите единицы формирования колонии на грамм ткани, как указано в текстовом протоколе.

07:21

Автоматизированное, высокопроизводительное обнаружение бактериальной приверженности клеткам-хозяевам

Related Videos

0 Views

09:54

Использование данных об одном черве для количественной оценки гетерогенности в caenorhabditis elegans-бактериальных взаимодействиях

Related Videos

0 Views

03:53

Выращивание полимикробной биопленки, связанной с муковисцидозом, для исследования фенотипов сообществ

Related Videos

0 Views

09:01

Хронический Сальмонеллы Зараженные Модель мыши

Related Videos

0 Views

12:50

Измерение бактериальной нагрузки и иммунного ответа в мышей, инфицированных Listeria моноцитогенес

Related Videos

0 Views

03:16

Обработка инфицированных тканей для бактериального перечисления в модели коинфекции у мышей

Related Videos

0 Views

04:21

Количественная оценка бактериальной нагрузки в сердце мыши после инъекции Listeria monocytogenes в хвостовую вену

Related Videos

0 Views

02:03

Оценка бактериальной нагрузки в селезёнке мыши для исследований инфекций

Related Videos

0 Views

03:08

Количественная оценка Clostridium difficile в образцах кала из модели инфицированных мышей

Related Videos

0 Views

03:52

Quantification of Bacterial Load in Mouse Spleen and Liver After Systemic Infection

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026