Энциклопедия экспериментов JoVE
Микробиология
0 просмотров • 2:04 мин. • February 26th, 2026
Начните с многоколодной пластины, содержащей вставку с коллагеновым покрытием.
Добавьте в колодец расширяющую среду.
Питательные вещества в среде способствуют размножению клеток, а ингибиторы дифференцировки сохраняют стволовидное состояние.
Добавьте суспензию эпителиальных клеточных кластеров, полученных из культур стволовых клеток толстой кишки, в колодец и инкубируете.
Клетки прилипают к покрытой коллагеном поверхности и получают питательные вещества как из верхнего, так и из нижнего отдела.
Ингибиторы предотвращают дифференцировку клеток и способствуют пролиферации клеточных кластеров.
С помощью фазово-контрастного микроскопа наблюдайте культуру.
После образования монослоя замените культурную среду свежей средой без ингибиторов дифференцировки клеток.
Это способствует дифференцировки клеток в зрелые эпителиальные клетки толстой кишки с плотными соединениями.
Эти клетки выделяют слизь и развивают функциональный монослой, имитирующий физиологический кишечный барьер для исследований взаимодействия хозяина и патогена.
Пипетка — 600 микролитров расширительной среды — в пространство под каждой вставкой. Пипетте 100 микролитров суспензии клеток из флакона в каждую вставку.
Верните пластину в инк
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео